Уэйн Найт родился в 1955 году в небольшом городке Картерсвилл (штат Джорджия, США). С детства он увлекся театром и после школы добился роли в местной постановке. Первый сценический опыт настолько вдохновил его, что он поступил в Университет Джорджии учиться актерскому искусству. После выпуска Найт устроился в местный театр, но вскоре переехал в Нью - Йорк, где участвовал в бродвейском спектакле 'Gemini', который шел три года. Потом он работал в частном детективном агентстве, иногда играя на сцене. Работаядля британского ТВ, актер познакомился с Эммой Томпсон - позже она поможет ему получить роль в фильме своего мужа Кеннета Браны. В 1987 году состоялся дебют Уэйна Найта в кино - маленькая роль в фильме 'Навсегда, Лулу', и вскоре он решает переехать в Калифорнию, чтобы сниматься в кино. В 1992 году актер многим запомнился в роли одного из полицейских, допрашивавших героиню 'Основного инстинкта', и Стивен Спилберг пригласил Уэйна Найта сыграть программиста - злоумышленника в 'Парке Юрского периода' (1993).Кроме ролей в кино, актер много работает на озвучивании анимационных фильмов.